Xây dựng quy trình sản xuất nha bào Clostridium difficile in vitro

Xây dựng quy trình sản xuất nha bào Clostridium difficile in vitro
Set up standrad protocol for in vitro production of Clostridium difficile spores for evaluating the sporicidal efficacy of disinfectants
Tác giả: Tăng Thị Nga, Lê Thị Thu Hường, Đặng Thị Thùy Dương, Vũ Thị Thu Hường
Tóm tắt:
Nghiên cứu này xây dựng thành công quy trình sản xuất nha bào của vi khuẩn Clostridium difficile (C. difficile) trong phòng thí nghiệm đạt tiêu chuẩn E2839-11 của Hiệp hội thử nghiệm vật liệu Hoa kì (ASTM) bao gồm nồng độ nha bào >108 CFU/ml, độ tinh khiết ≥ 95% và nha bào kháng với axít HCl 2,5M trong 10 phút. Mười bảy chủng vi khuẩn C. difficile đưa vào nghiên cứu gồm 2 chủng quốc tế C. difficile không sinh độc tố ATCC 43593 và ATCC 700057 và 15 chủng C. difficile sinh độc tố phân lập từ bệnh nhân tiêu chảy sau dùng kháng sinh. Chúng tôi chọn được 8 chủng có khả năng tạo thành thảm dày sau 11 ngày ủ, trong đó có 6 chủng có tỉ lệ chuyển dạng nha bào so với tế bào sinh dưỡng đạt hơn 90%. Trong số 6 chủng này, 3 chủng C. difficile được sử dụng để tối ưu hóa quy trình sản xuất nha bào gồm các bước thu hoạch, rửa và tinh khiết nha bào và thử khả năng kháng axít HCl 2,5M của nha bào. Chúng tôi đã sản xuất thành công tổng số 35 ml nha bào đạt tiêu chuẩn E2839-11của ASTM. Nha bào này là vật liệu cần thiết để đánh giá khả năng diệt nha bào của các chất khử trùng trong môi trường bệnh viện.